752分光光度计的原理和使用方法
更新时间:2024-08-06 点击次数:3933
752分光光度计具有自动化程度高,功能多,可塑性强等特点,在生化分析,生命科学研究,特别是DNA分析定量方面可发挥重要的作用。
原理:
752分光光度计由光源室、单色器、样品室、光电管暗盒、电子系统及数字显示器等部件组成,仪器内部光路系统。从钨灯或氢灯发出的连续辐射经滤色片选择聚光镜聚光后投向单色器进狭缝,此狭缝正好位于聚光镜及单色器内准直镜的焦平面上,因此进入单色器的复合光通过平面反射镜反射及准直镜变成平行光射向色散光栅。光栅将入射的复合光通过衍射作用形成按照一定顺序均匀排列的连续单色光谱,此时单色光谱重新返回到准直镜,然后通过聚光原理成像在出射狭缝上。出射狭缝选出带宽的单色光通过聚光镜落在试样室被测样品中心,样品吸收后透射的光经光门射向光电管阴极面。根据光电效应原理,会产生一股微弱的光电流。
752分光光度计的使用方法:
(1)将灵敏度旋钮调到“1”档(放大倍数zui小)。
(2)打开电源开关,钨灯点亮,预热30min即可测定。若需用紫外光则打开“氢灯”开关,再按氢灯触发按钮,氢灯点亮,预热30min后使用。
(3)将选择开关置于“T”。
(4)打开试样室盖,调节0%旋钮,使数字显示为“0.000”。
(5)调节波长旋钮,选择所需测的波长。
(6)将装有参比溶液和被测溶液的比色皿放入比色皿架中。
(7)盖上样品室盖,使光路通过参比溶液比色皿,调节透光率旋钮,使数字显示为100.0%(T)。如果显示不到100.0%(T),可适当增加灵敏度的档数。然后将被测溶液置于光路中,数字显示值即为被测溶液的透光率。
(8)若不需测透光率,仪器显示100.0%(T)后,将选择开关调至“A”,调节吸光度旋钮,使数字显示为“000.0”。再将被测溶液置于光路后,数字显示值即为溶液的吸光度。
(9)若将选择开关调至“C”,将已知标定浓度的溶液置于光路,调节浓度旋钮使数字显示为标定值,再将被测溶液置于光路,则可显示出相应的浓度值。