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UV2000紫外可见分光光度计的工作原理叙述

更新时间:2018-06-13    点击次数:5418
   UV2000紫外可见分光光度计的工作原理是具有限制性条件,UV2000紫外可见分光光度计的工作原理是物质对光的选择吸收和琅伯-比尔定律。我们这里讨论琅伯-比尔定律的限制性条件。
  根据量子光学理论,波长是能量的倒数,波长短能量大,容易产生杂散光,而220nm处属于短波部分;根据仪器学理论中的电光源理论,氘灯在220nm处能量很小,即信号很小,容易显现杂散光。
  通过溶液的光必须是平行的;通过溶液的光必须是单色光;待测溶液必须是纯净的、均匀的且浓度不宜过高,这是琅伯-比尔定律首要的三个前提条件。但是在实际的紫外可见分光光度计的制造和使用过程中这三个条件是不可能达到的。因为光是直线传播的,在分光光度计制造过程中,灯源发出的光是发散的,经过聚焦镜进行聚焦等直到经过溶液的整体过程中,光是不可能平行的。
  灯源发出的光是复合光,经过狭缝,再经过光栅分光等步骤,因为受到狭缝和光栅本身的限制,光栅分光不可能达到纯单色光。还有光度计的整体设计问题,光度计不可能没有其它的杂光存在。用户的溶液也不可能是纯净的,也会含有一些杂质,这些对光度的吸收都会存在影响。
  除以上三个方面的影响外,在实际的光度计应用过程中还会存在其他因素的影响,例如:经过比色皿的光是否垂直;比色皿宽度是否为10mm的标准值;测试波长是否准确;程序设计是否存在漏洞等等,都会直接影响到利用琅伯-比尔定律计算出的结果。所以在日常的测试过程中,得出的结果和琅伯-比尔定律有些偏差是很正常的,只是我们关注偏差多少的问题。
  因此,UV2000紫外可见分光光度计只测试220nm处的杂散光,不测试340nm处的杂散光,这样是不正确的,需测试220nm处杂散光。因为根据仪器学理论中的光电发射理论,光电倍增管在220nm处的光谱响应(灵敏度)低,容易显现杂散光。而测试340nm处杂散光的原因是*不同的,因为340nm处一般是氘灯换钨灯和仪器调换滤光片的地方,此时zui容易产生杂散光。
  所以,对于UV2000紫外可见分光光度计来讲,应该测试220nm和340nm两处的杂散光。UV2000紫外可见分光光度计杂散光测试步骤,首先将参比液注入配对石英石吸收池,分别放置在参比池座和试样池座内。再测定波段扫描基线并使之平滑。将减光片插入试样光路的滤光片槽内,其读数即为减光片的衰减值K,然后将减光片插入参比光路的滤光片座内,将石英吸收池中的蒸馏水依次换成上述截止滤光液,插入试样试样池座中,在相应的波段内扫描、打印;在记录纸的作标上量取测定波长处的透光度,乘以衰减值K,即得各测定波长处的杂散光值。

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