752分光光度计是用于测量样品在紫外可见光区吸光度的常用仪器。有效使用该设备,核心在于通过规范化的操作流程,获得准确、可重复的测量数据,为定量分析、纯度检查或反应监测提供可靠依据。操作涵盖仪器准备、参数设置、测量执行、数据处理及维护等环节。 一、测量前的准备与仪器检查
测量前需进行充分的准备工作。将仪器置于平稳、无振动、无强光直射的工作台。连接电源,但暂不开启。检查样品室是否清洁,取出比色皿架。准备所需比色皿,确保其透光面洁净、无划痕、无水渍。用待测溶液润洗比色皿。配制参比溶液与待测样品溶液,必要时进行过滤以去除悬浮物。开启仪器电源开关,预热规定时间,使光源与检测系统达到稳定状态。预热期间,可进行后续的波长设置。
二、波长选择与仪器调零
旋转波长选择旋钮,将波长设置至分析方法指定的数值,并观察波长显示窗确认。打开样品室盖。将装有参比溶液的比色皿放入样品架靠内侧的参比池位置,将装有待测溶液的比色皿放入另一位置。确保比色皿透光面朝向光路方向。关闭样品室盖。拉动样品架拉杆,使参比池置于光路中。调节旋钮,使数字显示器显示透射比为“100.0”或吸光度为“0.000”。此步骤用于校正基线,需在每次改变波长后执行。
三、样品测量与数据读取
调零完成后,推动样品架拉杆,使待测样品池进入光路。此时,显示器显示的数值即为该样品在设定波长下的吸光度或透射比值。等待读数稳定后记录。若需测量多个样品,依次将不同样品比色皿推入光路,读取并记录各数值。每次更换样品,都需确保比色皿外壁洁净,必要时可用擦镜纸擦拭。测量过程中,应避免频繁开关样品室盖,以减少环境光影响。对于未知样品,建议进行光谱扫描,确定其较大吸收波长。
四、数据处理与记录规范
测量完成后,及时、准确地记录数据。记录内容应包括:测量波长、使用的参比溶液、样品名称或编号、吸光度或透射比值、测量日期、操作者等信息。对于定量分析,需使用系列标准溶液在相同条件下绘制标准工作曲线,并将样品测量值代入计算浓度。确保数据处理方法正确,计算结果无误。原始数据与处理过程应清晰、完整地保存。
五、测量后操作与维护
测量结束后,取出所有比色皿。将溶液倒入指定废液容器。立即用纯水或适当溶剂清洗比色皿,清洗后倒置晾干。检查样品室内有无溶液洒落,并用软布或滤纸擦拭干净。关闭仪器电源开关,拔下电源插头。盖上防尘罩。定期清洁仪器外表面与样品室。长期不用时,应定期通电。
六、注意事项与常见问题
比色皿透光面禁止用手直接触摸。注入溶液量应适宜,避免过满溢出污染样品室。比色皿放入样品架时方向应保持一致。若样品吸光度过高,超出仪器线性范围,应稀释后重新测量。确保参比溶液能有效扣除背景干扰。仪器搬动或维修后,建议检查波长准确性。
有效使用752分光光度计,关键在于严谨、规范的操作习惯。从预热、调零、测量到清洁,每一步都需认真执行。清晰的理解测量原理、严格遵守操作规程、细致的数据管理,是获得高质量测量结果的根本保障。任何操作环节的疏漏都可能导致测量误差,影响分析结论的可靠性。