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紫外可见分光光度计的用途和主要指标介绍

发布时间:2021-04-19    点击次数:1728
紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理,用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,也可以测定细菌细胞密度。
 
紫外可见分光光度计的用途介绍:
 
1、对物质进行分析鉴定,紫外可见分光光度计在制药行业有着很大的前景。根据国内外的书籍记载,已经把很多的药品紫外线吸收波长和相对应的详细参数记录起来,给药品分析带来了很大的方便。
 
2、对比分析,把需要测定的样品与标准样品放在同等环境下进行测量。如果两种样品得到的检测结果完全一样,就表明这两种样品是同种物质。要是没有标准样品的话,可以选择跟已知的标准图谱对比分析,这种办法对仪器的要求相当高,检测环境要求极高。
 
3、在化学学科上的应用,其可以检验化学物质的纯度,同时也可以推算物质的原子结构,还可以对物质之间的氢键进行测定。特别是在有机化学方向的运用,前景更是广阔,能够对成分比较复杂的有机化合物进行成分鉴定。
 
紫外可见分光光度计的主要指标介绍:
 
(1)波长范围
波长范围是指仪器上、下限波长之间的工作范围,是与光源色器及检测器的光谱响应特性有关。有的仪器在波长范围两端缺乏足够的能量,难以正常工作。
(2)波长准确度
波长准确度是指仪器测定时标称的波长值与仪器出射的光线实际波长值参考值或理论值)之间的符合程度,一般用多次波长测量值平均值与参考值之差(即波长误差)来衡量。
(3)波长重复性
波长重复性是仪器在相同测试条件下、一个较短的时间内,对同一吸收或发射谱线进行连续多次波长测量,测量结果的一致性。也称波长精密度,即多次波长测试数据的符合程度。波长重复性一般用多次波长测试数据的离散性,即取波长准确度多次测试结果中最大值与最小值之差来衡量。
(4)光谱带宽
光谱带宽指从经过单色器后从出射狭缝出来的单色光的谱线轮曲线中峰高一半高度处的谱带宽度。光谱带宽可以表征仪器的光谱分辨率。光学带宽越小越好,仪器一般可通过调窄狭缝,使光谱带宽变小,但是同时光源能量弱,可能影响仪器对信号的检测,降低仪器的灵敏度。光源辉线或一些较尖锐的吸光谱都可用于光谱带宽的检查。
(5)杂散光
杂散光是指到达检测器的任何被测波长以外的其它波长的光。一般用在某规定的波长下测定在理论上该波长下完全不吸收的某种标准物质的透射比来衡量。如紫外区可用Nal溶液测定波长为220nm处的杂散光,在可见区可用各种有色玻璃截止滤光片。杂散光是光谱测量中误差的主要来源。杂散光越小越好。
(6)分辨率
分辨率是指仪器对于紧密相邻的峰可分辨的最小波长间隔,是衡量分光光度计性能的重要指标之一。单色器输出的单色光的光谱纯度、强度以及检测器的光谱灵敏度等是影响仪器分辨率)主要因素。新版的检定规程已取消分辨率要求,一般可用最小光谱带宽来衡量。
(7)光度准确度与透射比误差
光度准确度是吸光度测量的准确程度,一般用透射比标准物质实测吸光度值与其标准值之差(吸光度误差)衡量。因为吸光度误差在整个量程范围内的示值是非线性的》,因此用吸光度表示光度准确度时,必须定其吸光度范围。光度准确度也可用透射比表示,即透射比准确度,一般用透射比误差(实测透射比值与其标准值之差)来衡量。透射比误差是一个反映仪器综合性能的指标,与波长准确度、杂散光、仪器稳定性等众多因素有关。
(8)光度重复性与透射比重复性
光度重复性是在相同的仪器上、相同条件如仪器波长、光谱带宽不变,在短时间对同一样品进行多次重复测定吸光度,所测得值的一致性。光度重复性是影响分析结果可靠性的最主要因素,是关键性技术指标,一般用多次重复测量吸光度的最大值与最小值之差来衡量。如按同样方式测定透射比,即为透射比重复性。
(9)噪声
噪声是信号随时间而无规则的变化。噪声测量的方法是在仪器预热稳定后,在一定波长和一定光谱带宽下,分别扫描透射比100%或O透射比几分钟(一般取2min),量取获得图谱中最大值至最小值之间的值作为绝D噪声水平。如扫描较长时间,一般30min,可获得漂移。但在实际测定中,常用信噪比来描述仪的性能,如在100%线扫描时,噪声是1%,则信噪比为100:1。这个指标也是越小越好。
(1O)基线平直性
基线平直性是吸收池中不放任何东西时扫描基线(100%T线或OA线),基线倾斜弯曲的程度,它是仪器的重要性能指标之一。一般用扫描图谱中起点吸光度与偏离起点吸光度(取最大偏离点)之差来衡量。

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