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分光光度计的类型及常用波长有哪些

发布时间:2016-12-07    点击次数:2096
分光光度计有哪几种不同的分类方式:
1.分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为:(1)可见光分光光度计:测定波长范围为400~760 nm的可见光区 ;(2)紫外分光光度计:测定波长范围为200~400 nm的紫外光区;(3)红外分光光度计:测定波长范围为大于760 nm的红外光区;(4)荧光分光光度计:用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱;(5)原子吸收分光光度计:光源发出被测的特征光谱辐射,被经过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收,通过测定特征辐射被吸收的大小,来求出被测元素的含量。
2.分光光度计按自动化程度分类:可分为手动、半自动、自动分光光度计。
3.分光光度计按软件可分为:带扫描、不带扫描。
1.分光光度计核酸的定量
核酸的zui高吸收峰的吸收波长260 nm。利用260nm的波长可以定量测量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA的浓度。
除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度。如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。
A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。
A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品,A320一般是0。
2.分光光度计蛋白质的直接定量
这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg 公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。
3.分光光度计细菌细胞密度
细菌培养过程中,需要采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。
OD600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。在600nm波长下,以未加菌液的培养液作为空白液,测量定量培养后的含菌培养液。

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